Le Département des Sciences du Comportement est une section d'élite du FBI, spécialisée en psychologie criminelle. Elle intervient sur les pires scènes de crime des cinquante États américains, et traque les meurtriers en analysant leur comportement afin de pouvoir entrer dans leur esprit et les mettre le plus rapidement possible sous les verrous. Au sein de cette unité qui évolue au gré des départs et des arrivées, chaque membre de l'équipe apporte son expérience et son expertise pour arrêter les tueurs en série qui sévissent à travers les États-Unis.

Suite aux évènements survenus dans THE AVENGERS, l'agent Phil Coulson retourne au sein de l'organisation mondiale du maintien de l'ordre, le S.H.I.E.L.D., pour y mettre sur pied une petite équipe d'agents extrêmement bien entraînés afin de s'attaquer aux affaires non encore classées ayant un trait aux phénomènes nouveaux, étranges et inconnus. Constistuée du très intègre agent Grant Ward, expert en combat et renseignements, de l'agent Melinda May, pilote émérite et experte en arts martiaux et des très brillants, si ce n'est un peu étranges socialement, agents scientifiques Leo Fitz et Jemma Simmons, l'équipe sera épaulée par Skye, nouvelle recrue civile, hacker et fan de super-héros.